1 试剂与材料
除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和GB/T 6682规定的一级水。
1.1 乙腈。
1.2 丙酮，重蒸。
1.3 甲醇，色谱纯。
1.4 氯化钠，140℃ 烘烤4 h。
1.5 柱后衍生试剂，试剂包（P/N：YS-CB-001）
1.5.1 0.05mol/L NaOH 溶液：R315，以1 L水溶解。
1.5.2 OPA稀释溶液：R312，以1 L水溶解。
1.5.3 领苯二甲醛（O-Phthaladehyde，OPA）：R301 。
1.5.4 疏基乙醇（Thiofluor）：R302 。
1.6 固相萃取柱，FJ-NH2-500.6：氨基柱，容积6 mL，填充物 500mg 。
1.7 滤膜，0.2μm，0.45μm，溶剂膜。
1.8 农药标准品见表1
表1 10种氨基甲酸酯类农药及其代谢物标准品
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序号 |
中文名 |
英文名 |
纯度 |
溶剂 |
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1 |
涕灭威亚砜 |
aldicarb sulfoxide |
≥96% |
甲醇 |
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2 |
涕灭威砜 |
aldicarb sulfone |
≥96% |
甲醇 |
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3 |
灭多威 |
methomyl |
≥96% |
甲醇 |
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4 |
3-羟基克百威 |
3-hydroxycarbofuran |
≥96% |
甲醇 |
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5 |
涕灭威 |
aldicarb |
≥96% |
甲醇 |
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6 |
速灭威 |
metolcarb |
≥96% |
甲醇 |
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7 |
克百威 |
carbofuran |
≥96% |
甲醇 |
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8 |
甲萘威 |
carbaryl |
≥96% |
甲醇 |
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9 |
异丙威 |
isoprocarb |
≥96% |
甲醇 |
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10 |
仲丁威 |
fenobucarb |
≥96% |
甲醇 |
1.9 农药标准溶液配制
1.9.1 单个农药标准溶液，直接使用农药标样。（浓度为1000mg/L）
贮存在 -18℃以下冰箱中，使用时根据各农药在对应检测器上的响应值，吸取适量的标准储备液，用甲醇稀释配制成所需的标准工作液。
1.9.2 农药混合标准溶液
根据各农药在仪器上的响应值，逐一准确吸取一定体积的单个农药储备液，分别注入同一容量瓶中，用甲醇稀释至刻度配成农药混合标准储备溶液，使用前用甲醇稀释成所需质量浓度的标准工作液。
2 仪器设备
2.1 液相色谱仪，梯度系统，配有荧光检测器（FLD）。
2.2 食品加工器。
2.3 匀浆机。
2.4 氮吹仪。
2.5 柱后衍生系统：CoM6000PCR 双柱后衍生系统
3 测定步骤
3.1 试样制备
同NY/T 761-2008《蔬菜和水果中磷、氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯农药多残留的测定》中部分的方法一。
3.2 提取
同NY/T 761-2008《蔬菜和水果中磷、氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯农药多残留的测定》中部分的方法一。
3.3 净化
从100 mL 具塞量筒中准确吸取10.00 mL 乙腈相溶液，放入150 mL 烧杯中，将烧杯放在80℃ 水溶锅上加热，杯内缓缓通入氮气或空气流，将乙腈蒸发近干；加入2.0 mL 甲醇+二氯甲烷（1+99）溶解残渣，盖上铝箔，待净化。
将氨基柱用4.0 mL 甲醇+二氯甲烷（1+99）预洗条件化，当溶剂液面到达柱吸附层表面时，立即加入上述待净化溶液，用 15 mL 离心管收集洗脱液，用 2mL 甲醇+二氯甲烷（1+99）洗烧杯后过柱，并重复一次。将离心管置于氮吹仪上，水浴温度50℃ ，氮吹蒸发至近干，用甲醇准确定容至 2.5 mL 。在混合器上混匀后，用0.2 μm 滤膜过滤，待测。
3.4 色谱参考条件
3.4.1 色谱柱
预柱： C18预柱，600220；
分析柱：C42545，Comatex，C18-CB，5 μ ，250×4.6。
3.4.2 柱温，42℃ 。
3.4.3 荧光检测器，λex330 nm，λem465 nm。
3.4.4 溶剂梯度与流速
溶剂梯度与流速见表二